湖北名优ELISA 宁波熙宁检测技术供应

    ELISA原理及类型ELISA是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或的免疫分析技术。酶联免疫吸附试验的标准程序，通常是把蛋白、抗体、或等（即抗原）直接或是以捕捉抗体（captureAb）固定在固相载体上，再加入一级检测抗体（primarydetectionAb），形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶（enzyme）标记了，即可用来直接测定抗原的量，若无，则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。测定抗原量的方法是加入该酶的底质（substrate），作用后产生出现的颜色深浅和样本中的抗原量呈正比的关系，依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。1、直接法（directELISA）将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。2、间接法（indirectELISA）此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它更多的免疫反应性。

    ELISA主要有以下四种类型：直接ELISA（抗原被吸附的板;筛选抗体）间接ELISA（抗原被吸附的板；筛选抗原/抗体）夹心ELISA（抗体被吸附的板;筛选抗原）竞争性ELISA（筛选抗体）直接ELISA在直接ELISA中，蛋白质抗原被吸附到孔中，并冲洗来未吸附抗原的量。然后，通过标记的抗体直接检测抗原。优缺点分析优点1快速，*使用一种抗体且步骤较少2消除了第二抗体的交叉反应性缺点1细胞涂片：通过化学键将非粘附细胞粘附在盖玻片上2一抗的免疫反应性可能受到酶或标签标记的不利影响3为每个特定的ELISA系统标记一抗，既费时又昂贵4由于标记的抗体密度较低导致较低的灵敏度间接ELISA在间接ELISA中，蛋白质非特异性吸附到孔中。因为通过使用二抗间接检测抗原，检测分两个步骤进行，所以称为间接ELISA。在次检测中添加了抗原特异性的未标记抗体，然后添加检测抗体的第二抗体。优缺点分析优点1可以在一个物种中制备许多一抗，并且可以将相同的标记二抗用于检测2由于没有标记，保留了抗体的更大免疫反应性3高标记的二抗密度可实现高灵敏度，从而导致信号放大缺点1细胞涂片：通过化学键将非粘附细胞粘附在盖玻片上2二抗可能会发生交叉反应。

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